CRYO-METHODS

Techniques de préparation d’échantillons pour la microscopie électronique

Cette page rassemble l’ensemble des ressources qui utilisent les techniques de préparation d’échantillons à basse température pour une meilleure conservation morphologique. Les échantillons ainsi préparés pourront être observés en cryo-microscopie en transmission (MET) ou à balayage (MEB).

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Services

  • Congélation ultra rapide par immersion dans l’éthane liquide ou par haute pression d’échantillons entiers (bactéries, virus, particules, liposomes, …) dans de la glace vitreuse jusqu’à 200µm d’épaisseur
  • Cryo-sections (techniques CEMOVIS et Tokuyasu)
  • Cryo-substitution et enrobage en résine automatisés à très basse température
  • Cryo-fracture et sublimation
  • Cryo-microscopie en transmission et à balayage

Access method

  • With assistance
  • As service delivery

Ressources en préparation d’échantillons pour microscopie électronique

Designation

Plateau

Plateau

Cryo-ultramicrotome
Leica UC7/FC7

Chambre cryo amovible, cryosphère (évite la contamination par du givre), système antistatique & micromanipulateur

METi – Campus UPS

Cryosubstituteur
AFS-2/FSP

Automatisation complète des process, associé à un automate de gestion des réactifs

METi – Campus UPS

high-pressure cryofixative
Leica EM ICE

Congélation de -8000 à -12000°/s sous une pression de 2000 bars

METi – Campus UPS

Cryoplunge
Leica EMGP

Automate de congélation ultra-rapide dans l’éthane, équipé stéréo-microscope

METi – Campus UPS

Module de cryopréparation
PP3000T Quorum

Chambre de cryo tranfert MEB FEG Quanta 250 FEI
pour métallisation, cryo-fracture et sublimation

CMEAB, Faculté de Médecine Rangueil

Quelques publications réalisées avec le concours de ces ressources :

  • Bidimensional lamellar assembly by coordination of peptidic homopolymers to platinum nanoparticles. Nat Commun., 11(1):2051. Manai G., Houimel H., Rigoulet M., Gillet A., Fazzini PF., Ibarra A., Balor S., Roblin P., Esvan J., Coppel Y., Chaudret B., Bonduelle C., Tricard S. (2020)
  • Good Vibrations: Structural Remodeling of Maturing Yeast Pre-40S Ribosomal Particles Followed by Cryo-Electron Microscopy. Molecules. 25(5):1125. Shayan R., Rinaldi D., Larburu N., Plassart L., Balor S., Bouyssié D., Lebaron S., Marcoux J., Gleizes PE., Plisson-Chastang C. (2020)
  • Post-mitotic dynamics of pre-nucleolar bodies is driven by pre-rRNA processing. J. Cell Science Octobre 2012. Carron C, Balor S, Delavoie F, Plisson-Chastang C, Faubladier M, Gleizes PE, O’Donohue MF
  • Cord factor (trehalose 6,6′-dimycolate) forms fully stable and non-permeable lipid bilayers required for a functional outer membrane. Biochim Biophys Acta. Sep. 2013. Rath P, Saurel O, Czaplicki G, Tropis M, Daffé M, Ghazi A, Demange P, Milon A.
  • Artificial feeding of Varroa destructor through a chitosan membrane: a tool for studying the host-microparasite relationship. Tabart J1, Colin ME, Carayon JL, Tene N, Payre B, Vetillard A. Exp Appl Acarol, 2013,61(1), 107-18.
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