CRYO-METHODES

	Techniques de préparation d’échantillons pour la microscopie électronique
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Cette page rassemble l’ensemble des ressources qui utilisent les techniques de préparation d’échantillons à basse température pour une meilleure conservation morphologique. Les échantillons ainsi préparés pourront être observés en cryo-microscopie en transmission (MET) ou à balayage (MEB).

 

Services :

• Congélation ultra rapide par immersion dans l’éthane liquide ou par haute pression d’échantillons entiers (bactéries, virus, particules, liposomes, …) dans de la glace vitreuse jusqu’à 200µm d’épaisseur
• Cryo-sections (techniques CEMOVIS et Tokuyasu)
• Cryo-substitution et enrobage en résine automatisés à très basse température
• Cryo-fracture et sublimation
• Cryo-microscopie en transmission et à balayage

Mode d’accès :

• Assistance
• Prestation de service

 

Ressources en préparation d’échantillons pour microscopie électronique

 

Nom	Caractéristiques techniques	Lieu
Cryo-ultramicrotome Leica UC7/FC7	Chambre cryo amovible, cryosphère (évite la contamination par du givre), système antistatique & micromanipulateur	METi – Campus UPS
Cryosubstituteur AFS-2/FSP	Automatisation complète des process, associé à un automate de gestion des réactifs	METi – Campus UPS
Cryofixateur haute pression Leica EMPACT	Congélation de -8000 à -12000°/s sous une pression de 2000 bars	METi – Campus UPS
Cryoplunge Leica EMGP	Automate de congélation ultra-rapide dans l’éthane, équipé stéréo-microscope	METi – Campus UPS
Module de cryopréparation PP3000T Quorum	Chambre de cryo tranfert MEB FEG Quanta 250 FEI pour métallisation, cryo-fracture et sublimation	CMEAB, Faculté de Médecine Rangueil

Quelques publications réalisées avec le concours de ces ressources :

• Carron C, Balor S, Delavoie F, Plisson-Chastang C, Faubladier M, Gleizes PE, O’Donohue MF; J. Cell Science Octobre 2012, Post-mitotic dynamics of pre-nucleolar bodies is driven by pre-rRNA processing.
• Rath P, Saurel O, Czaplicki G, Tropis M, Daffé M, Ghazi A, Demange P, Milon A.. Cord factor (trehalose 6,6′-dimycolate) forms fully stable and non-permeable lipid bilayers required for a functional outer membrane. Biochim Biophys Acta. Sep. 2013.
• Artificial feeding of Varroa destructor through a chitosan membrane: a tool for studying the host-microparasite relationship. Tabart J1, Colin ME, Carayon JL, Tene N, Payre B, Vetillard A. Exp Appl Acarol, 2013,61(1), 107-18.