MICROSCOPES CONFOCAL & SPINNING DISK

Les microscopes à balayage laser sont les premiers à avoir vu le jour. Outils extrêmement polyvalents et donc indispensables, ils équipent chaque plateau de microscopie photonique du réseau TRI. Ils capturent uniquement le signal fluorescent issu du plan focal en se débarrassant de la fluorescence parasite des plans supérieurs et inférieurs. L’illumination laser point par point permet une grande flexibilité d’acquisition, incluant notamment la possibilité de zoomer sur l’image jusqu’à atteindre la limite de résolution optique (quelque dizaines de nanomètres). Cette capacité de haute résolution lui confère cependant une certaine lenteur, pouvant être contrecarré par des systèmes confocaux résonnants, des capteurs plus sensibles ou des systèmes de type spinning disk. Ils se divisent en deux, les microscopes confocaux mono-photon et microscopes confocaux bi-photons. Ces derniers peuvent pénétrer la matière plus en profondeur et atteindre une meilleure résolution.

La fonction « spinning-disk » allie quant à elle la rapidité du microscope champ large à la résolution d’un confocal. Cette technique utilise des lasers pour illuminer les échantillons et des caméras ultra-sensibles pour détecter le signal fluorescent. A la différence du confocal à balayage laser, le spinning disk illumine l’ensemble de la zone d’observation de manière simultanée permettant de réduire la durée d’acquisition (environ 150ms en routine) et donc la photo-toxicité.